Fase gerak sarua jeung fase cair getih, sareng aya sababaraha hal anu kedah diperhatoskeun nalika dianggo. Di antarana, aya sababaraha "pitfalls" anu kedah diperhatoskeun.
01. Ukur pH fase mobile sanggeus nambahkeun pangleyur organik
Upami anjeun ngukur pH nganggo aditif organik, pH anu anjeun kéngingkeun bakal béda ti sateuacan nambihan pangleyur organik. Nanging, anu paling penting nyaéta konsisten. Upami anjeun sok ngukur pH saatos nambihan pangleyur organik, pastikeun pikeun nyatakeun léngkah-léngkah anjeun dina metode anu anjeun anggo supados batur bakal nuturkeun metode anu sami. Metoda ieu teu 100% akurat, tapi sahenteuna bakal tetep metoda konsisten. Ieu tiasa langkung penting tibatan kéngingkeun nilai pH anu akurat.
02. Taya panyangga dipaké
Tujuan panyangga nyaéta pikeun ngontrol pH sareng nyegah tina robih. Loba métode séjénna ngarobah pH fase mobile, nu bisa ngabalukarkeun shifts dina waktu ingetan, bentuk puncak, jeung respon puncak.
Asam format, TFA, jeung sajabana sanes panyangga
03. Teu maké panyangga dina rentang pH normal
Unggal panyangga ngagaduhan lebar kisaran 2 pH, dimana éta nyayogikeun stabilitas pH pangsaéna. Panyangga luar jandela ieu moal nyadiakeun résistansi éféktif pikeun parobahan pH. Boh nganggo panyangga dina kisaran anu leres, atanapi pilih panyangga anu nyertakeun kisaran pH anu anjeun peryogikeun.
04. Tambahkeun panyangga kana solusi organik
Pergaulan leyuran panyangga jeung fase organik paling dipikaresep bakal ngabalukarkeun panyangga ka endapanana. Dina loba kasus, sanajan présipitasi geus lumangsung, éta kénéh hésé pikeun ngadeteksi. Inget pikeun salawasna nambahkeun leyuran organik kana fase cai, nu bisa greatly ngurangan kasempetan présipitasi panyangga.
05. Campur gradién konsentrasi tina 0% kalayan pompa a
Pompa sadia kiwari bisa éféktif nyampur fase mobile na degas inline, tapi teu sadaya jelema ngagunakeun métode anjeun bakal boga pompa kualitas luhur. Campur A jeung B kana leyuran tunggal jeung ngajalankeun eta 100% inline.
Salaku conto, 950 ml campuran awal organik tiasa disiapkeun ku nyampur sareng 50 ml cai. Kauntungannana ieu téh nya éta bisa ngurangan variability antara HPLCs sarta ngurangan kamungkinan gelembung na présipitasi dina sistem. Perlu dicatet yén rasio campuran pompa nyaéta 95: 5, anu henteu hartosna yén waktos ingetan sateuacana dicampur dina botol ogé 95: 5.
06. Teu ngagunakeun asam dirobah bener (basa) pikeun ngarobah panyangga
Ngan ukur nganggo asam atanapi basa anu ngabentuk uyah panyangga anu anjeun anggo. Contona, hiji panyangga natrium fosfat kudu disiapkeun kalawan ngan asam fosfat atawa natrium hidroksida.
07. Teu nyarios sagala informasi ngeunaan panyangga dina metoda, kayaning nambahkeun 5g tinanatrium fosfat kana 1000ml cai.
Jinis panyangga nangtukeun kisaran pH anu tiasa disangga. Konsentrasi diperlukeun nangtukeun kakuatan panyangga. 5 gram atanapi natrium fosfat anhidrat sareng 5 gram monosodium fosfat monohidrat gaduh kakuatan panyangga anu béda.
08. Nambahkeun pangleyur organik saméméh dipariksa
Upami metodeu saméméhna nganggo solusi panyangga pikeun garis dasar B, sareng metode anjeun nganggo solusi organik pikeun garis dasar B, anjeun mudahan tiasa netepkeun panyangga dina pipa pompa sareng sirah pompa.
09. Angkat botol jeung kosongkeun tetes panungtungan
Aya kasempetan alus nu moal boga cukup fase mobile pikeun ngarengsekeun sakabéh ngajalankeun sarta sampel anjeun bakal ngaroko. Salian kamungkinan ngaduruk sistem pompa sareng kolom, fase sélulér bakal nguap lengkep sareng fase sélulér dina luhureun botol bakal robih.
10. Paké ultrasonic degassing fase mobile
Titik anu paling penting nyaéta pikeun mastikeun yén sadaya uyah panyangga larut, tapi ieu mangrupikeun cara anu paling awon pikeun degas sareng bakal gancang ngamanaskeun fase sélulér, nyababkeun komponén organik nguap. Pikeun ngahemat masalah anu teu dipikabutuh engké, candak lima menit pikeun nyaring vakum fase sélulér anjeun.
waktos pos: Aug-27-2024